miRNeasy Serum/Plasma Advanced Kit是经典的miRNeasy Serum/Plasma  Kit的升级版，提取效果相当，但是操作更简单，无需QIAzol和酚氯仿分相。

血清或血浆（200µl）与缓冲液RPL混合，以释放和稳定来自血浆蛋白和细胞外囊泡中的RNA。然后将样品与缓冲液RPP混合并离心以沉淀蛋白质。向上清液中加入异丙醇，以提供RNA分子（>18nt)与硅胶膜结合的适当条件。然后将样品加入RNeasy UCP MinElute柱中，RNA与膜结合，其他污染物在随后的洗涤步骤中被洗掉。在最后一步中，使用20 µl不含RNase的水洗脱总RNA（>18个nt）。

关于血清血浆样本

1，血清和血浆样本中主要含有小RNAs（<100nt)，因此无需分开纯化小RNA和大RNA组分。

2，50-200µl人血浆和血清中RNA的产量通常太低，大概在50-150ng, 无法用NanoDrop等分光光度法OD测量进行量化。可以使用更灵敏的比色或荧光测定法进行定量，即RiboGreen测定法。

3，不能有细胞或细胞碎片的污染。当RNA产量偏高或通过变性琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色或使用QIAxcel®系统或Agilent 2100生物分析仪，出现rRNA条带，说明有细胞或细胞碎片的污染。

由于血浆和血清中RNA的含量极低，miRNA定量推荐使用qiagen的LNA修饰的miRCURY LNA miRNA PCR Starter Kit（cat:339320），引物LNA修饰且验证有效、灵敏度高（1pgRNA可检测）、特异性好（单碱基区分）。