血清和血浆样本溶于QIAzol Lysis Reagent中。加入氯仿后，裂解液离心后分成水相和有机相。RNA位于上层水相，DNA位于中间相，蛋白位于下层有机相或中间相。提取上层水相后，加入乙醇以提供RNA结合的合适条件，RNA分子大于18个核苷酸。样品再加入RNeasy MinElute离心柱，总RNA结合到膜上，苯酚和其他污染物被有效洗去，用12ul无RNase水中洗脱出高纯度高浓度的RNA。

关于血清血浆样本

1，血清和血浆样本中主要含有小RNAs（<100nt)，因此无需分开纯化小RNA和大RNA组分。

2，50-200µl人血浆和血清中RNA的产量通常太低，大概在50-150ng, 无法用NanoDrop等分光光度法OD测量进行量化。可以使用更灵敏的比色或荧光测定法进行定量，即RiboGreen测定法。

3，不能有细胞或细胞碎片的污染。当RNA产量偏高或通过变性琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色或使用QIAxcel®系统或Agilent 2100生物分析仪，出现rRNA条带，说明有细胞或细胞碎片的污染。

由于血浆和血清中RNA的含量极地，miRNA定量推荐使用qiagen的LNA修饰的miRCURY LNA miRNA PCR Starter Kit（cat:339320），引物LNA修饰且验证有效、灵敏度高（1pgRNA可检测）、特异性好（单碱基区分）。