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产品简介
转膜液干粉适用于湿法转膜,本品为白色至类白色,每袋转膜液干粉可配制1L 1×转膜液。
1L 1×湿法转膜液干粉配方 | ||
组分 | 含量 | 浓度 |
三羟甲基氨基甲烷(Tris) | 3.0g | 25mM |
甘氨酸(Glycine) | 14.4g | 192mM |
使用方法
1.取大约800mL蒸馏水倒入烧杯,并向其中缓慢加入1袋转膜液干粉,搅拌溶液直至颗粒完全溶解;
2.向步骤1补加200ml甲醇(乙醇),即配成1L 1×转膜缓冲液,用于湿转法转膜。
注意事项
1.可以重复利用2-3次,如果转膜缓冲液颜色变成浅棕色或黄褐色,应该丢弃。
2.对于小分子量蛋白(<20kDa),建议使用孔径更小的0.22μm PVDF膜,转膜条件为200mA,20-25min或300mA,15-20min,亦可增加甲醇(乙醇)含量至25%以加强对凝胶里小分子蛋白的固定作用。
3.对于常规中小分子量蛋白(25-70kDa),建议转膜条件为300mA,30min左右。
4.对于常规大分子量蛋白(<200kDa),可酌情延长转膜时间,建议转膜条件为300mA,45-60min。
5.对于分子量特别大的蛋白(>200kDa),延长转膜时间,建议转膜条件为300mA,60-90min或更长,亦可在转膜液中加入适量SDS至终浓度0.025-0.1%左右,以加强蛋白从凝胶中的释放。同时,由于转膜时间较长,应注意降温。
6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。