QIAGEN One-Step RT-PCR Kit包含Omniscript逆转录酶和Sensiscript逆转录酶的混合物、HotStarTaq DNA Polymerase、QIAGEN OneStep RT-PCR Buffer、dNTP混合液和Q-Solution。产物适用于病毒检测、单细胞RT-PCR、基因表达分析。

QIAGEN OneStep RT-PCR Enzyme Mix含有为逆转录和PCR反应特别设计的酶。独特组合的Omniscript和Sensiscrip逆转录酶对RNA模板有高度亲和性，确保RNA逆转录的灵敏度达到1 pg到2 µg。逆转录完成后，升温至95°C，15分钟，活化HotStarTaq DNA Polymerase同时使逆转录酶失活。这种方法可减少引物二聚体等非特异性扩增产物的生成，并减少背景的影响，确保RT-PCR的高灵敏度和可重复性。

退火温度范围宽

引物的最佳退火温度取决于碱基对的组成（如A、T、G、C核苷酸的比例）、引物的浓度和反应的离子环境。QIAGEN PCR Buffers含有K+和NH4+，使用该缓冲液可在很宽的温度范围内增加特异性PCR产物的产量。其原理是破坏非特异性结合的引物对，提供更加可靠的反应环境，减少繁琐的温度优化过程。相反，如使用仅含K+的PCR或一步式RT-PCR缓冲液，PCR最佳退火温度的范围较窄，可靠性较差。

QIAGEN OneStep RT-PCR Buffer专为提高逆转录和PCR扩增的效率而设计。该缓冲液含有新型辅助剂，可防止逆转录酶对PCR扩增的抑制，而这是一步式RT-PCR中常见的问题。该缓冲液确保在较大的温度范围和Mg2+浓度范围内，引物与模板特异性结合，可对多种RNA模板进行高效的RT-PCR扩增。

Q-Solution,可促进高GC含量或含较多二级结构的模板的逆转录和扩增。 使用Q-Solution可简化复杂模板RT-PCR的优化过程。