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脱脂奶粉是将鲜牛奶脱脂后干燥制成的粉末,脂肪含量通常≤1.5%,蛋白质含量≥34%。它是Western Blot、ELISA等免疫实验中应用最广泛的封闭剂之一,通过在膜上形成非抗原性蛋白层,封闭未结合位点,从而减少一抗或二抗的非特异性结合,降低背景干扰。此外,脱脂奶粉也可用于微生物培养,例如配制10%(w/v)溶液用于乳酸菌的维持培养。
产品组分
本产品为单一组分的脱脂奶粉干粉,通常不含其他添加物。产品特性如下:
外观:白色至类白色自由流动粉末
水分:<5%
脂肪:≤1.5%
蛋白质:≥34%
溶解性:易溶于水
使用方法
1.配制封闭液
推荐使用1×TBST或1×TBS配制,常用工作浓度为3%–5%(w/v)。例如配制5%溶液:称取5g脱脂奶粉,先用少量TBST搅拌成均匀糊状,再补足TBST至100mL,充分混匀即可。
2.膜的封闭
转膜完成后,用洗涤液漂洗膜1–2分钟。加入足量封闭液完全覆盖膜,室温下于摇床上孵育60分钟即可。对于背景较高的抗体,可尝试4℃封闭过夜。
3.抗体稀释
配制好的封闭液也可直接用于稀释一抗和二抗。
注意事项
1.不适用场景:脱脂奶粉成分复杂,含有微量生物素,不适合生物素-亲和素检测系统;同时建议避免用于稀释anti-goat及anti-sheep的二抗,以免产生交叉反应。
2.保存条件:干粉应室温密封、干燥保存,避免受潮。配制成溶液后建议现配现用,不可长期保存。
3.实验操作:请穿实验服并戴一次性手套操作。