本产品采用预混配方的胶溶液与缓冲溶液，将其1:1混合，再加入促凝剂即可凝胶。灌入下层胶后，无需液封，可直接灌入上层胶，简便快捷。本产品适用于Tris-Gly电泳体系，所制备的凝胶为免染PAGE胶，蛋白条带经紫外曝光即可成像，无需染胶。配套提供的改良型促凝剂，具有良好的稳定性和促凝效果，配胶过程中无需添加TEMED。本试剂盒可配制125块mini PAGE胶(以0.75mm厚度胶计算)，灌制的凝胶可用于变性或非变性PAGE凝胶电泳。

♦紫外成像 无需染胶，蛋白条带可直接紫外曝光成像；

♦快速制备凝胶 数分钟即可灌制多块凝胶，无需计算所需溶液量，无需稀释；

♦彩色上层胶 可制备彩色的上层胶，为点样和区分不同凝胶提供最大便利；

♦避免异味 无需使用TEMED，避免恶臭气味；

♦条带清晰 尤其小分子蛋白质条带比在传统凝胶中更清晰；

♦一步法灌胶 灌制下层胶后直接注入上层胶，无需液封。

凝胶浓度选择参考

以制备一块0.75/1.0/1.5mm的mini胶为例

1.各组分在使用前请颠倒混匀6-8次；

注意：在配胶前，使胶溶液及缓冲液平衡到室温(室温放几分钟)，可有效避免凝胶中气泡的形成。

2.下层胶配制：取等体积下层胶溶液和下层胶缓冲液（免染），各2.0/2.7/4.0mL，混匀；

3.上层胶配制：取等体积上层胶溶液和彩色上层胶缓冲液，各0.5/0.75/1.0mL，混匀；

4.向步骤2的混合溶液中加入40/60/80μL的改良型促凝剂，立即充分混匀，然后注入制胶玻璃板中，使液面距短玻璃板上沿约1.5cm；

注意：1）此溶液为过量，请勿全部注入。2）混匀操作避免剧烈振荡，在灌注的过程中避免将气泡灌入制胶玻璃板中。

5.向步骤3的混合溶液中加入10/15/20μL的改良型促凝剂，立即充分混匀，无需等待下层胶凝固，即可将混匀后的溶液轻缓注入制胶玻璃板中，轻轻插入梳齿；

注意：加入下层胶后需在5min内将上层胶注入制胶玻璃板中内，且灌注上层胶溶液可沿着长玻璃板轻缓注入，避免将下层胶冲散。

6.待胶凝固后（约15min），拔去梳齿即可用于电泳。推荐电泳条件：150V，约60min（或200V，约45min），待溴酚蓝指示剂到达底部边缘时即可停止电泳。

注意：1）请尽量使用新配制的电泳缓冲液。2）胶凝固后上下层胶分界线平整度略弱于传统方法配的胶，但对后续电泳没有影响。

7.待电泳结束后，即可将凝胶从玻璃板中取出，放入成像仪紫外曝光成像或在紫外切胶台上，302nm左右紫外激发1-5min便可呈现清晰的蛋白条带。

注意：观察Wester Blot转印后膜上蛋白条带，必须在电泳后，将凝胶经紫外激发出现清晰条带后，再进行转膜操作。若直接转膜再紫外激发，荧光信号会很弱或无信号。