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| 英文名称 | DAPI solution,1mg/ml |
| CAS | 28718-90-3 |
| 别名 | 4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐 |
| 纯度 | ≥95% (HPLC和 TLC) |
| 分子式 | C16H15N5·2HCl |
| 分子量 | 350.25 |
| 储存条件 | -20℃,避光,有效期至少2年 |
| 规格 | 1mL/支 |
DAPI(4,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)是一种能够与DNA中大部分A、T碱基相互结合的荧光染料,常用于荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当DAPI与双链DNA结合时,最大吸收波长为358nm,最大发射波长为 461nm。DAPI的发射光为蓝色,且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠,可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。
本产品为DAPI的DMSO储存液,浓度为1mg/mL,最常用的工作液,浓度是10ug/mL。根据实验需求可以按0.5-15 ug/mL工作浓度摸索最佳浓度。
使用方法
对于培养细胞
1.取适量DAPI储存液加到PBS中,制备成10μg/mL的DAPI工作溶液。
2.对于贴壁细胞,加入适量工作液覆盖住细胞即可,室温避光孵育3-5min。
3.对于悬浮细胞, 至少加入待染色细胞体积的3倍工作液或在培养体系中直接加储存液使终浓度为10ug/mL,室温避光孵育3-5min。
4.用PBS或合适的缓冲液洗细胞2-3次,去除DAPI工作液。
5.染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测,激发波长360-400nm。
对于组织切片
制好的玻片上滴加几滴DAPI工作液,染色10分钟,流水冲去染液,滤纸吸除多余水分,加一滴荧光封片液,置于荧光显微镜下观察。
注意事项
1.DAPI被普遍认为具有致癌性,操作时应戴手套,并避免交叉污染。
2.本产品需避光,并尽量避免反复冻融。
3.如果需要免疫荧光染色,先免疫荧光染色,再DAPI染色。