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琼脂糖(Agarose)电泳是检测、分离 DNA 片段的重要方法,该产品为高纯度低电渗琼脂糖制品,不含 DNA 酶、RNA 酶和蛋白酶等成分。电泳分离性能强,条带清晰,适合于各种 DNA 和RNA 片段的电泳分析。
凝胶配置
1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是 1×TAE 或 0.5×TBE);
2.根据配制凝胶量及浓度,准确称量一定重量的琼脂糖和一定体积的电泳缓冲液后,置于合适体积的三角锥形瓶中混匀备用(缓冲液总体积不宜超过锥形瓶容量的 1/2);
3.在锥形瓶的瓶口上盖上保鲜膜,并在膜上扎一些小孔,然后置于微波炉中加热;
4.加热过程中,当溶液沸腾时,可关闭微波炉,戴手套小心晃动锥形瓶,使琼脂糖充分均匀溶解。重复数次该操作,直至琼脂糖完全溶解;
5.取出锥形瓶,向溶液中加入适量的核酸染料GelRed(货号:SDM0006)或GelGreen(货号:SDM0005)并充分混匀;
6.将琼脂糖倒入制胶槽中,并插入梳子。如有气泡存在,需要将气泡赶出;
7.室温冷却凝胶后(约 30min~1h),可置于电泳槽内进行电泳。
琼脂糖浓度推荐
琼脂糖浓度 | 最佳线性DNA分辨范围(bp) |
0.5% | 1000~30000 |
0.7% | 800~12000 |
1.0% | 500~10000 |
1.2% | 400~7000 |
1.5% | 200~3000 |
2.0% | 50~2000 |