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Tris-Glycine-SDS缓冲液常用作Tris-Gly体系的变性蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)缓冲液,不适用于Bis-tris体系。本品为白色至类白色,每袋Tris-Glycine-SDS缓冲液干粉可配制1L 1×Tris-Glycine-SDS缓冲液。
1L 1×Tris-Glycine-SDS缓冲液干粉配方 | ||
组分 | 含量 | 浓度 |
三羟甲基氨基甲烷(Tris) | 3.0g | 25mM |
甘氨酸(Glycine) | 14.4g | 192mM |
十二烷基硫酸钠(SDS) | 1.0g | 0.1% (w/v) |
使用方法
1.取大约600mL蒸馏水倒入烧杯,并向其中缓慢加入1袋Tris-Glycine-SDS缓冲液干粉,搅拌溶液直至颗粒完全溶解。
2.向步骤1所得溶液中加入蒸馏水,定容至1L,即为1×Tris-Glycine-SDS电泳缓冲液。不需要额外调节pH,溶解后1×溶液的pH值一般会在8.3左右。
注意事项
1.回收使用:回收的电泳液可作为外槽缓冲液重复使用1–2次,但为了获得最佳电泳效果,建议内槽使用新鲜配制的缓冲液。
2.适用体系:本品含SDS,仅适用于变性蛋白电泳。若进行非变性PAGE电泳,需使用不含SDS的Tris-Glycine缓冲液。
3.储存方式:干粉:室温干燥可长期保存。工作液建议现配现用,若需保存,可密封置于4℃,但不宜超过1个月;若出现浑浊或沉淀应弃用。
4.操作防护:干粉含SDS,称量或倾倒时易飞扬,建议在通风处操作,穿戴实验服和一次性手套。