产品介绍

三色预染蛋白Marker(10-130kDa)包含了从10kDa到130kDa共9种高度纯化并预染的重组蛋白质（10、17、25、33、43，55、70、95、130 kDa,均带 His 标签），其中 70 kDa 条带为橙红色，10 kDa 为绿色，其他条带均为蓝色。表观分子量经过Biorad1610363和thermo26610、26614 非预染蛋白质分子量标准标定。产品适合作为SDS-PAGE和Western的蛋白质分子量标准。

使用方法

1.室温下解冻后完全溶解并轻轻充分混匀。本产品已经配置在1×SDS-PAGE上样缓冲液中，可直接使用，不要煮沸、稀释和加入还原剂。

2.取本产品5µL（5×1.5mm 胶孔，5µL足够）与实验样品同时进行聚丙烯酰胺凝胶电泳；建议有条件的实验室在初次使用本产品时可以根据自身的实验条件和实验习惯通过预实验确定合适的上样量，这样可以节约成本，同时获得效果更佳的实验图片；使用考马斯亮蓝染色或做His标签Western blot时建议减少上样量至需要量的1/5-1/3。

电泳示意图

操作流程

1. 室温下解冻后轻轻混匀或者是用移液枪缓慢吹打均匀；

2. 从原液中吸取所需的上样量至新的微量离心管中；

3. 95℃-100℃下加热 5 min ，使蛋白质完全变性；

4.低速离心10Sec后，取 3-5μl 加入到聚丙烯酰胺凝胶电泳上样孔中进行电泳(for SDS-PAGE  mini gel)；

5.电泳结束后，可通过考马斯亮蓝染色(货号：SDP0036或者SDP0037)、银染（货号：SDP0038）或其他蛋白染色方法进行可视化观察。

注意事项

1.每种蛋白质在不同缓冲体系及不同胶浓度下受迁移率及电荷影响位置会有细微偏移；

2.该产品仅适用于变性电泳，不适用于非变性电泳；

3.推荐使用15%的聚丙烯酰胺凝胶电泳。其他浓度并非不适用， 建议进行预实验选用最适合的体系及胶浓度。浓度太低时， 低分子量蛋白迁移速度快于溴酚蓝；浓度太高时，高分子量蛋白分离效果不好，有可能聚集于分离胶的上部；

4.银盐染色比考马斯亮蓝染色敏感10-100倍，建议上样量适当减少；

5.收到货后建议分装成几等份冷冻保存， 防止污染及反复冻融造成蛋白质降解；

6.变性后的非预染Marker一定要保存在-20°C并尽快使用完毕；

7.上样量可根据胶板大小及厚度适当增加或减少上样量。 以下为不同缓冲液体系下蛋白 Marker 电泳图