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SDS-PAGE上样缓冲液(还原,5×)是以溴酚蓝为染料, 5倍浓缩的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液,应用于还原型SDS-PAGE的蛋白样品制备和上样。该缓冲液中含有DTT,可使蛋白质分子的链内二硫键和链间二硫键断裂,通过二硫键连接的各蛋白亚单位彼此分离,经考马斯亮蓝染色以后在电泳凝胶上显现清晰蛋白条带。
操作流程
1.将SDS-PAGE上样缓冲液(还原,5×)与蛋白样品按照1:4的比例混匀。
2.将蛋白样品置于沸水浴中加热5-10分钟。
3.待蛋白样品充分变性后冷却至室温,以小于10000 rpm的条件离心30秒。
4.离心后,以取适量上清,直接加入SDS-PAGE凝胶加样孔内, 进行常规电泳。
注意事项
1.加样前在室温或37-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀,以确保溶液混合均匀。
2.本品不含还原剂如巯基乙醇或DTT。
3.本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。