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采集血样的时候,基因表达谱可在几分钟内发生明显的变化。EDTA等抗凝血剂可避免血液凝固,但不能避免mRNA诱导的转录或调控引起的基因表达变化。将小鼠、大鼠或其他小动物的动物血液收集在RNAprotect Animal Blood Tubes中可避免转录水平的变化。
RNAprotect Animal Blood Tubes中样本可在15–25°C条件下保存48小时,2–8°C条件下保存两周,或在–20°C条件下保存至少三个月,不会出现明显的RNA降解。
使用RNeasy Protect Animal Blood Kit(cat:73224)纯化RNA(含miRNA)。将RNAprotect Animal Blood Tubes离心使样本沉淀,沉淀水洗后重悬在Buffer RSB中。样本在Buffer RBT中被蛋白酶K消化后,样本离心通过QIAshredder离心柱后实现匀浆。在样本中加入乙醇后,离心通过RNeasy MinElute离心柱。使用DNase消化总DNA,并依次用Buffer RW1和Buffer RPE漂洗。用Buffer REB洗脱获得纯化的RNA。