订货电话
023-86186752
15213057346
电话订货时间:
工作日9:00-17:00
订货邮件
2484097008@qq.com
订货QQ
2484097008
微信在线咨询
订单下载
订单.xls
AllPrep DNA/RNA FFPE Kit (50)
产品编号: 80234
产品包装:50T
价格: ¥ 11,400
产品简介
使用说明
产品文件
相关产品
相关论文
产品问答

AllPrep DNA/RNA FFPE Kit可使用同一样本纯化DNA和RNA,而不需将样本分为两份再分别进行纯化操作。如将样本分为两份分别纯化DNA和RNA,其纯化出的DNA和RNA来自不同的细胞群落,可能具有不同性质特征。从同一样本中同时纯化DNA和RNA可减少浪费,因为FFPE样本是十分珍贵的样本,通常很难恢复且样本量少。

FFPE样本甲醛固定过程中,会引起核酸与核酸间,核酸与蛋白间的交联,AllPrep DNA/RNA FFPE Kit创新的解交联技术,可最大程度上逆转福尔马林化学修饰,而不引起DNA和RNA的进一步降解。FFPE样本要在优化的裂解缓冲液中孵育,使得RNA释放出来,而DNA形成沉淀。离心后,将含有RNA的上清和含有DNA的沉淀分别处理,纯化RNA和DNA。再次进行孵育有一定的解交联作用,然后使用RNeasy MinElute或QIAamp MinElute离心柱纯化RNA和DNA。用柱上DNA酶处理纯化的RNA,以有效去除DNA污染。根据RNA与离心柱的结合情况,纯化的RNA中可含有也可不含miRNA等小RNAs。

由于固定和包埋,FFPE样本中的核酸通常都严重片段化,核酸的分子量通常小于从新鲜或冷冻样本中分离出的核酸的分子量。从同一FFPE样本中分离DNA和RNA面临着很大困难:片段化的DNA长度短,且部分是单链结构;因此其更像RNA,而非完整的DNA。设计PCR和RT-PCR的扩增产物长度尽可能短点)。在cDNA合成中,应使用基因特异性引物,而非oligo-dT引物。如果无法使用基因特异性引物,则可使用任意引物。


使用本产品的文献: