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RNeasy PowerFecal Pro Kit可应用于粪便、肠道物、污泥和废水等样品,采用珠磨研磨和化学裂解相结合,采用QIAGEN的第二代抑制剂去除技术®(IRT),可产生高产量高纯度RNA,可立即用于下游应用,包括RT-PCR,qPCR和NGS测序(例如RNA-seq或宏转录组)。
取50-200毫克粪便,在含有研磨珠的2 ml研磨管中均质化每个样品。研磨珠之间的机械碰撞与细胞膜的化学破坏相结合,允许宿主和微生物细胞的裂解。然后使用IRT去除粪便等样本中常见的物质,这些物质会抑制PCR和其他下游应用。然后将裂解物通过MB RNA离心柱。使用柱上 DNase 消化去除 DNA。然后使用洗涤溶液去除酶和消化的核酸,用不含RNase的水洗脱出高产量高纯度的RNA。
从粪便微生物中分离的核酸的产量和完整性受消化系统状态、个体饮食以及从采集样本到保存之间的时间长短的影响很大。为保证粪便中核酸的质量,请在收集后尽快处理样品,或者使用PowerProtect DNA/RNA 试剂可在室温下稳定粪便样本。
