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Ni-NTA Agarose是Ni-NTA与Sepharose CL-6B support偶联,具有强结合能力(可达50mg/ml),非特异性结合少。Ni-NTA(氨基三乙酸镍)是qiagen的专利技术,对含有6个或以上组氨酸残基(连续或交替)亲合标签的蛋白选择能力强。该技术可在天然或变性条件下,从所有表达体系中一步纯化几乎所有的His-tagged蛋白。NTA含有四个镍离子螯合位点,与镍的结合能力比其他仅有三个金属螯合位点的金属螯合纯化方法的结合能力强。多出的一个螯合位点可防止镍离子脱落,因此具有更强的结合能力,蛋白纯度比金属螯合纯化方法的蛋白纯度高。QIAexpress技术可用于从杆状病毒、哺乳动物细胞、酵母和细菌等各种表达体系中纯化His-tagged蛋白,下游应用包括:结构和功能研究、蛋白结晶,用于三维结构检测、蛋白与蛋白,蛋白与DNA相互作用研究、抗体制备、纯化放大的生产规模。
His-tagged蛋白的纯化包括四个步骤:裂解、结合、洗涤和洗脱。Ni-NTA Agarose是纯化带有His标签的重组蛋白。His标签上的组氨酸残基能高特异性的结合到固定的镍离子上。细胞裂解上清液上样到纯化基质上,His-tagged蛋白结合,其他蛋白则流过基质。洗涤后,His-tagged蛋白可在天然或变性条件下洗脱。

Ni-NTA-Agarose,是单独的纯化填料,可以搭配的1ml空柱(cat:34924)或5ml的空柱(cat:34964),搭配蛋白纯化仪或真空泵,能承受的最大压力是2.8 psi,如果需要能承受更大的压力,请选择Ni-NTA Superflow填料(cat:30410)或预装柱Ni-NTA Superflow Cartridges(cat:30761)。